

肝样细胞:辽宁中添自主研发专利技术,利用病毒介导的转基因功能,将富集转录因子GATA4和HNF4α转入多能干细胞中,定向诱导分化为肝样细胞,替代损伤的肝细胞发挥生理作用。
我们采用自主研发专利技术,利用病毒介导的转基因功能,将富集转录因子GATA4和HNF4α转入多能干细胞中,定向诱导分化为肝样细胞。体外培养的肝样细胞能够表达细胞色素P450(CYP450)代谢酶、胆汁酸合成酶和转运体,并在肝样细胞内外均检测到各种胆汁酸成分,证明肝样细胞具备合成和分泌胆汁酸的能力。通过RT-PCR检测,肝样细胞与诱导前的多能干细胞相比,新开启了TAT的表达,抑制了IL6的表达,功能检测显示部分诱导后细胞已具有成熟肝细胞摄取与排泌ICG的功能,可替代损伤的肝细胞发挥生理作用。

GATA4和HNF4α介导的hUC-MSCs向肝细胞定向分化的结果(标尺为40μm)
A:重组慢病毒介导肝转录因子GATA4和HNF4α转入hUC-MSCs大约两周时形成的肝样细胞克隆:A1,荧光显微镜明场观察到肝样细胞形态:A2,GFP通道观察到对应的肝样细胞表达绿色荧光蛋白:A3,A1,A2叠加:B.挑去肝样细胞克隆传代至胶原包被的培养皿中,持续培养30d时的形态。
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